Quy trình xét nghiệm: Thử nghiệm phát hiện dùng citrat

1112

Quy trình thử nghiệm hướng dẫn phát hiện dùng citrat của vi khuẩn, được áp dụng ở Khoa vi sinh của một số cơ sở y tế, có vai trò quan trọng trong Y học lâm sàng và cận lâm sàng.

Quy trình xét nghiệm: Thử nghiệm phát hiện dùng citrat

Giảng viên Liên thông Cao đẳng Xét nghiệm – Trường Cao đẳng Y Dược Pasteur cho biết, người làm kỹ thuật trên cần và phải có chứng chỉ hoặc chứng nhận về chuyên ngành Vi sinh y học. 

Nguyên tắc thử nghiệm phát hiện dùng citrat là gì?

Giảng viên Liên thông Cao đẳng Xét nghiệm chia sẻ nguyên tắc thực nghiệm tại mục kiến thức y dược như sau: Thạch citrate được dùng để kiểm tra khả năng dùng citrate là nguồn năng lượng của vi khuẩn. Môi tường có chứa citrate là nguồn một số-bon duy nhất, muối ammonium là nguồn ni-tơ chính. Trường hợp có vi khuẩn phát triển chứng tỏ có dùng citrate. Khi vi khuẩn chuyển hóa citrate, muối ammonium sẽ bị giáng hóa thành ammoniac làm kiềm hóa môi trường. Chất chỉ thị xanh bromthymol trong môi trường sẽ chuyển từ màu xanh lá cây sang màu xanh nước biển khi pH trong môi trường trên 7,6.

Trang thiết bị, vật tư dùng trong thử nghiệm phát hiện dùng citrat

Trang thiết bị

    • Tủ an toàn sinh học (ATSH) cấp 2
    • Kính hiển vi quang học.
    • Máy ly tâm
    • Máy trộn, lắc
    • Ống vô trùng có nắp đậy.
    • Đèn cồn, que cấy, lam kính, lá kính mỏng (coverslip) bút viết kính, dầu soi kính, giấy thấm dầu.
    • Pipet Pasteur vô trùng.

Sinh phẩm hóa chất dùng trong thử nghiệm phát hiện dùng citrat

    • Thạch nghiêng chứa citrate, muối ammonium, đệm, xanh bromthymol.
    • Nước muối sinh lý 0,9%.

Kiểm tra chất lượng thử nghiệm phát hiện dùng citrat

  • Một số hóa chất dùng trong thử nghiệm phát hiện dùng citrat được kiểm tra theo Quy trình kiểm tra chất lượng sinh phẩm, hóa chất, lưu lại kết quả sau khi kiểm tra.
  • Chứng:

+ Chứng Âm: Escherichia coli ATCC 25922

+ Chứng Dương: Klebsiella pneumoniae ATCC 13883


Quy trình xét nghiệm: Thử nghiệm phát hiện dùng citrat là gì?

An toàn thử nghiệm phát hiện dùng citrat

  • Làm thao tác thử nghiệm phát hiện dùng citrat với mẫu bệnh phẩm trong tủ ATSH.
  • Dùng một số thiết bị bảo hộ cá nhân.

Nội dung làmthử nghiệm phát hiện dùng citrat

Các bạn sinh viên Cao đẳng Y Dược chuyên ngành Cao đẳng Xét nghiệm có thể tham khảo bước thực hiện như sau:

  • Bước 1: Dùng que cấy lấy một khóm riêng rẽ (lấy phần phồng nhất của khóm
  • Bước 2: Đốt miệng ống thạch, ria cấy lên bề mặt thạch nghiêng, đậy nắp ống.
  • Bước 3: Ủ trong môi trường hiếu khí 35 – 37 độ C tối đa trong 4 ngày.

Diễn giải kết quả và báo cáo thử nghiệm phát hiện dùng citrat

  • Thử nghiệm phát hiện dùng citrat Dương tính: có khi vi khuẩn phát triển và làm đổi màu môi trường từ màu xanh lá cây sang xanh nước biển trên bề mặt thạch nghiêng.
  • Thử nghiệm phát hiện dùng citrat Âm tính: không có vi khuẩn mọc và môi trường vẫn giữ nguyên màu xanh lá cây.

Lưu ý khi thử nghiệm phát hiện dùng citrat là gì?

  • Trường hợp thử nghiệm cho kết quả không rõ ràng cần làm lại.
  • Vi khuẩn phát triển mạnh trên thạch nhưng không làm đổi màu môi trường có thể là thử nghiệm dương tính, cần ủ thêm hoặc làm lại thử nghiệm với ít khóm hơn.


Thử nghiệm phát hiện dùng citrat giúp phát hiện vi khuẩn

  • Không cấy vi khuẩn vào phần đứng của thạch.
  • Không thử nghiệm bằng vi khuẩn từ môi trường lỏng.
  • Ghi chép rõ ràng kết quả thử nghiệm phát hiện dùng citrat và một số thông tin quy định vào phiếu trả lời kết quả và sổ kết quả xét nghiệm.
  • Lưu trữ một số biểu mẫu thử nghiệm phát hiện dùng citrat phiếu kiểm tra chất lượng theo đúng quy định của khoa.

Nguồn: 1539/QĐ-BYT ngày 20/4/2017 của Bộ trưởng Bộ Y tế

Được Cao đẳng Y Dược TPHCM – Trường Cao đẳng Y Dược Pasteur tổng hợp